本报讯 诺如病毒感染性腹泻在全世界范围内均有流行,备受社会各界广泛关注。目前国内外对诺如病毒的研究均以人群的粪便和海鲜品标本为主,针对水体中诺如病毒的检测报道较少,诺如病毒在水中虽然比较稳定但无法增值,导致难以检测。经过一个多月的艰难摸索,目前,市疾控中心已成功建立起水中诺如病毒富集检测技术。
据了解,市疾控中心实验人员以携带诺如病毒基因片段的质粒为载体,经倍比稀释至适宜浓度后制成模拟水样,采用膜过滤法富集样品中的病毒核酸后再运用荧光定量RT-PCR技术进行检测。首先对部分调节过pH值的样品利用millipore真空泵进行过滤,滤膜经洗脱、超滤、浓缩后与未浓缩的样品同时进行核酸提取和纯化;然后进行标准品的制备和反应体系的配制;最后在扩增区域利用ABI 7500 realtime-PCR system进行核酸扩增。经分析计算,得到样品富集前后和标准品扩增曲线的对比图、样品分别在诺如病毒Ⅰ型Ⅱ型标准曲线上的位置示意图以及检测CT值和浓度值,实验结果符合预期。
实验的各项数据表明,市疾控中心已掌握水中诺如病毒富集和分型(诺如病毒Ⅰ型、Ⅱ型)鉴定技术,已具备水型诺如病毒感染疫情应急检测能力。实验人员表示,将运用该技术开展外环境水中诺如病毒监测,为水型诺如病毒感染疫情预警提供基础数据。
·王彧超 冯启榕·
